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抗體親和力成熟 抗體親和力成熟
抗體優(yōu)化

FCMES-AM?抗體親和力成熟

  • 單點飽和突變結(jié)合高通量哺乳系統(tǒng)FCMES-AM?
  • 無偏向性的CDR區(qū)飽和突變
  • 保證交付的抗體親和力提高5倍以上

服務(wù)介紹

親和力成熟是指得到的抗體親和力不能滿足抗體后期開發(fā)的要求，從而通過體外實驗提高抗體親和力的過程。常規(guī)的親和力成熟方法通過構(gòu)建飽和突變庫，用噬菌體展示、酵母展示、核糖體展示等技術(shù)進(jìn)行篩選。

百英生物抗體親和力成熟平臺是基于飽和突變技術(shù)FCMES-AM?（Full Coverage Mammalian Expression System For Affinity Maturation），但與構(gòu)建飽和突變庫的方法不同，主要技術(shù)結(jié)合了高通量哺乳細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，采用在CDR區(qū)每個氨基酸（除了半胱氨酸和甲硫氨酸）上進(jìn)行單點飽和突變，從而獲得足夠的突變多樣性，同時又不會破壞抗體的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。該途徑實現(xiàn)了對體內(nèi)抗體親和力成熟過程的最近似的模擬，很好的解決了飽和突變庫的偏向性問題。改造后的抗體通過SPR或FACS進(jìn)一步親和力驗證。

如果您有抗體親和力成熟服務(wù)需求，請盡快與我們?nèi)〉寐?lián)系！

我們的抗體優(yōu)化服務(wù)還包括:

抗體親和力成熟介紹

服務(wù)亮點

無偏向性的CDR區(qū)飽和突變

  • 全覆蓋變異（CDR區(qū)）
  • 17種氨基酸突變頻率一致

高效服務(wù)

  • 親和力提高至少5倍
  • 經(jīng)ELISA/SPR/FACS檢測

交付速度快

  • 6-8周
  • 高通量的哺乳細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)
立即咨詢

服務(wù)流程

單點飽和突變
單點飽和突變
高通量的哺乳細(xì)胞表達(dá)
高通量的哺乳細(xì)胞表達(dá)
親和力篩選熱點突變
親和力篩選熱點突變
熱點組合表達(dá)和親和力驗證
熱點組合表達(dá)和親和力驗證

抗體親和力成熟
服務(wù)詳情

服務(wù)步驟 服務(wù)詳情 服務(wù)周期 交付物
階段Ⅰ：親和力成熟序列設(shè)計
  • 單點飽和突變
 3-4天 親和力成熟定點突變的設(shè)計報告
階段Ⅱ：哺乳系統(tǒng)高通量表達(dá)
  • 哺乳系統(tǒng)展示庫的構(gòu)建
  • 高通量哺乳系統(tǒng)分泌表達(dá)
  • 上清Binding ELISA檢測
  • 突變熱點的確定
 4周
  • 上清篩選檢測的ELISA報告
階段Ⅲ：突變熱點組合
  • 熱點組合序列設(shè)計
  • 表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建
  • 瞬轉(zhuǎn)表達(dá)和純化
 1-2周
  • 表達(dá)質(zhì)粒測序報告
  • SDS-PAGE測序報告
  • SEC-HPLC檢測報告
  • Biacore Ranking affinity
  • Biacore Full-KD
  • 檢測非特異性結(jié)合
  • 確定最終的親和力提高的分子
 1周
  • 檢測報告
  • 序列文件

案例分享

案例1:

The parental antibody is VHH, after affinity maturation, off of the VHH improves and the affinity increases 23-fold, 19-fold and 6-fold separately.

抗體親和力成熟 案例1

Koff of the VHH improves and the affinity increases 6-fold, 23-fold and 19-fold separately.

案例2:

The parental antibody is mouse IgG, after affinity maturation, the affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.

抗體親和力成熟 案例2

Affinity increases 120-fold, 48-fold and 46-fold separately.

“我們有自己的FCMES-AM?抗體親和力成熟平臺。我們團(tuán)隊致力于抗體開發(fā)的研究，促使該服務(wù)在行業(yè)中取得更好的成績，保證交付的抗體親和力得到改進(jìn)。”
Sufeng Cai
蔡素鳳
抗體親和力成熟團(tuán)隊

FAQs

  • 什么情況下抗體需要親和力改造？

    通過點突變、鏈替換等技術(shù)對抗體進(jìn)行親和力成熟，提高抗體活性，以便更好的用于下游實驗。抗體親和力的高低，都將影響抗體對目標(biāo)抗原的親和力，所以進(jìn)行親和力優(yōu)化是十分必要的。除親和力優(yōu)化之外，還會對抗體免疫原性、半衰期等方面的改造，以此改善抗體的特異性和效力，減少用藥劑量，降低毒副作用等。 1

  • 體內(nèi)、體外抗體親和力改造有何區(qū)別？

    在體內(nèi)

    機體在接受抗原刺激后，體細(xì)胞發(fā)生高頻突變，突變產(chǎn)生的各種親和力不同的B細(xì)胞克隆，經(jīng)過濾泡樹突細(xì)胞捕獲，使得后代B細(xì)胞及其產(chǎn)生的抗體對抗原的平均親和力得到了提升，從而實現(xiàn)了親和力的體內(nèi)成熟。 2

    在體外

    體外抗體親和力成熟屬于體外功能蛋白質(zhì)分子進(jìn)化的范疇，是模擬體內(nèi)抗體親和力成熟的方式。體外抗體親和力成熟主要是在抗體 CDR區(qū)基因中引入突變采用各種突變策略模擬體內(nèi)的高頻突變，基于大容量抗體庫的構(gòu)建和篩選技術(shù)得到高親和力的基因工程抗體。最簡單的方法是通過隨機突變，也稱為點突變，模擬體內(nèi)的體細(xì)胞超突變。

  • 抗體親和力改造的原理是什么？

    在體內(nèi)初次反應(yīng)產(chǎn)生抗體的親和力較低，在隨后的抗原刺激下，抗體可變區(qū)基因發(fā)生體細(xì)胞突變，造成親和力的改變，親和力提高的變種具有選擇優(yōu)勢，最后形成產(chǎn)生高親和力抗體的B克隆細(xì)胞。3

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抗體親和力成熟 Project Commitment

Project Commitment

You will have a dedicated project manager for each project when you work with us, guaranteeing efficient planning, clear communication, and a personalized approach with a strong focus on you. We aim to build trust in all our collaborations, with strong relationships with more than 2,500 biotechnology and pharmaceutical companies.

參考文獻(xiàn)

  • Chan, T. Y., & Groves, A. T. (2021). Affinity maturation: Highlights in the application of in vitro strategies for the directed evolution of antibodies. Emerging Topics in Life Sciences, 5(5), 601-608. https://doi.org/10.1042/ETLS20200331
  • Doria-Rose, N. A., & Joyce, M. G. (2015). Strategies to guide the antibody affinity maturation process. Current Opinion in Virology, 11, 137. https://doi.org/10.1016/j.coviro.2015.04.002
  • Alberts B, Johnson A, Lewis J, et al. (2002). The Generation of Antibody Diversity. Molecular Biology of the Cell. 4th edition. New York: Garland Science. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK26860/

服務(wù)和產(chǎn)品

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